1586 के अंत में इंग्लैंड में यह कार्रवाई होती है - 1587 की शुरुआत। उसकी सौतेली बहन मैरी स्टुअर्ट, जो अंग्रेजी सिंहासन की आकांक्षा रखती थी, को अंग्रेजी एलिजाबेथ के आदेश से फोटोटिंगे के महल में कैद कर लिया गया था। उनकी नर्स अन्ना कैनेडी उनके साथ हैं। नजरबंदी की कठोरता और कई कठिनाइयों के बावजूद, मैरी अडिग रहती है। वह बार-बार सिक्योरिटी को रिश्वत देने और एलिजाबेथ के खिलाफ षड्यंत्र रचने में कामयाब रही।

उसका आखिरी गार्ड, फ्लाइंग, उसके प्रति बेहद सख्त है। लेकिन हाल ही में, उनके भतीजे मोर्टिमर फ्रांस और इटली में भटकने से लौटते हुए फोट्रिन्जी में दिखाई दिए, जहां उन्होंने कैथोलिक धर्म में परिवर्तित हो गए। वहाँ वह मैरी का समर्थक बन गया और अब उसे मुक्त करने के लिए इंग्लैंड पहुँचा। उसके पक्ष में बारह विश्वसनीय योद्धा हैं जो मदद के लिए सहमत हैं। मोर्टिमर की रिपोर्ट है कि मैरी को लंदन में रखने की कोशिश की गई और उन्हें मौत की सजा सुनाई गई। रानी ने युवक को चेतावनी दी कि भागने की विफलता की स्थिति में, मौत उसकी प्रतीक्षा कर रही है। मोर्टिमर लेडी स्टुअर्ट को मुक्त करना चाहता है। उसकी उपज, मारिया ने लंदन में अर्ल ऑफ लीसेस्टर को एक पत्र लिखा, उसे उम्मीद है कि वह मोर्टिमर और उसकी मदद करेगा।

महारानी के दरबार में वेस्टमिंस्टर के पैलेस में, वे अंजु की ड्यूक के साथ एलिजाबेथ की आगामी शादी के बारे में चर्चा कर रहे हैं। रानी ने खुद अनिच्छा से इस शादी के लिए सहमति जताई। वह सिंहासन के लिए वैध वारिस होने के लिए अपने विषयों की इच्छा के बारे में सोचने के लिए मजबूर है। लेकिन अब एलिजाबेथ के विचार दूसरे में व्यस्त हैं - उसे अपनी सौतेली बहन मारिया पर अदालत के फैसले को मंजूरी देनी है। लॉर्ड बुर्ली की अगुवाई में इंग्लैंड की रानी के वातावरण के अधिकांश महानुभावों ने फैसले का समर्थन किया। केवल श्रेयसबरी का पुराना अर्ल लेडी स्टुअर्ट के लिए खड़ा है, जो उसे और लीसेस्टर के अर्ल का समर्थन करता है।

महल में अपने भतीजे के साथ उड़ता हुआ दिखाई देता है। उड़ान ने एलिजाबेथ को एक कैदी से एक व्यक्तिगत मुलाकात का अनुरोध करने का पत्र दिया। जब रानी पत्र पढ़ती है, तो उसकी आँखों में आँसू आ जाते हैं, उसके आसपास के लोग उन्हें अपनी बहन के लिए दया का संकेत समझने के लिए तैयार होते हैं। वास्तव में, अंग्रेजी रानी मोर्टिमर को अपने प्रतिद्वंद्वी को चुपके से मारने के लिए कहती है, लेकिन कोई भी यह अनुमान नहीं लगाएगा कि झटका शाही हाथ से लगाया गया था। नेफ्यू ऑफ फ्लाइट सहमत है, क्योंकि उसे पता चलता है कि केवल चालबाजी से वह लेडी स्टुअर्ट से परेशानी को दूर कर सकता है।

लेक्स्टर के अर्ल के साथ अकेला छोड़ दिया, मोर्टिमर उसे मैरी को एक पत्र देता है। यह पता चलता है कि काउंट दस साल से महारानी एलिजाबेथ का पसंदीदा रहा है, अब युवा, सुंदर फ्रांसीसी ड्यूक से उसकी शादी न केवल उसके हाथ में, बल्कि उसके दिल में भी उसकी आशा को पूरी तरह से नष्ट कर देती है। लेडी स्टुअर्ट का पत्र एक बार फिर उन्हें शाही सिंहासन की आशा के साथ प्रेरित करता है। यदि वह उसे खुद को मुक्त करने में मदद करता है, तो वह उससे हाथ मिलाने का वादा करती है। लेकिन लिस्टर चालाक और बहुत सावधान है, वह मोर्टिमर से कहता है कि वह अपने समान विचारधारा वाले लोगों के साथ बातचीत में कभी भी अपने नाम का उल्लेख न करे।

गिनती एलिजाबेथ और मैरी के बीच एक बैठक की व्यवस्था करने का प्रस्ताव करती है, फिर, वह सुनिश्चित है, निष्पादन रद्द कर दिया जाएगा, और हम बाद में बात कर सकते हैं। इस तरह का विवेक युवक को शोभा नहीं देता; वह लीसेस्टर को इंग्लैंड की रानी को एक महल में ले जाने के लिए कहता है और जब तक वह मैरी को छोड़ने का आदेश नहीं देता, तब तक उसे वहां बंद रखा जाता है। गिनती इसके लिए सक्षम नहीं है।

लीसेस्टर अपनी योजना को अंजाम दे रहा है। एलिजाबेथ के साथ एक बैठक में, वह उसे शिकार करने के लिए, मारिया के महल की जेल की ओर मुड़ने और पार्क में चलने के दौरान अप्रत्याशित रूप से मिलने के लिए राजी करने का प्रबंधन करता है। रानी अपने प्रेमी के "असाधारण" प्रस्ताव से सहमत है।

मारिया पार्क में टहलने की अनुमति देकर आनन्दित होती है, लेकिन पोलेट ने उसे सूचित किया कि यहाँ वह एलिजाबेथ के साथ मुलाकात करेगी। बैठक के पहले मिनटों में, खूबसूरत कैदी अपनी ताज पहनाई हुई बहन के चरणों में लटकी हुई थी, जिसमें फाँसी को खत्म करने और उसे रिहा करने का अनुरोध किया गया था, लेकिन एलिजाबेथ ने लेडी स्टुअर्ट को अपमानित करने की कोशिश की, जिसने उसे असफल व्यक्तिगत जीवन की याद दिला दी। अपने पागल अभिमान पर काबू पाने और खुद पर नियंत्रण खो देने में असमर्थ, मारिया ने अपनी बहन को याद दिलाया कि वह एक नाजायज संतान है, न कि उसकी सही उत्तराधिकारिणी। क्रोधित एलिजाबेथ जल्दी से निकल जाती है।

मारिया समझती है कि उसने अपने हाथों से मोक्ष की आशा को बर्बाद कर दिया, लेकिन मोर्टिमर, जो आया, रिपोर्ट करता है कि इस रात वह और उसके लोग फोट्रिग्यू को बल से पकड़ लेंगे और उसे मुक्त कर देंगे। अपने साहस के लिए, युवक को पुरस्कार मिलने की उम्मीद है - मैरी का प्यार, लेकिन वह उसे मना कर देती है।

महल के चारों ओर का पार्क सशस्त्र लोगों से भरा हुआ है। मोर्टिमर के दोस्त खबर लाते हैं कि उनके समर्थकों में से एक, टॉलोन भिक्षु, ने एलिजाबेथ की हत्या का प्रयास किया, लेकिन उसके खंजर ने केवल मंत्र को छेद दिया। साजिश को उजागर किया गया है, इंग्लैंड की रानी के सैनिक पहले से ही यहां हैं और उन्हें तत्काल भाग जाना चाहिए, लेकिन मोर्टिमर मैरी के लिए अपने जुनून से अंधा हो गया है, वह या तो उसे मुक्त करने या उसके साथ मरने के लिए बनी हुई है।

एलिजाबेथ के जीवन पर एक असफल प्रयास के बाद, चूंकि हत्यारा एक फ्रांसीसी नागरिक निकला, फ्रांसीसी राजदूत को इंग्लैंड से तत्काल निष्कासित कर दिया गया, जबकि शादी का समझौता टूट गया था। जौ ने लिस्टर पर दुर्भावनापूर्ण इरादे से आरोप लगाया, क्योंकि यह वह था जिसने एलिजाबेथ को लेडी स्टुअर्ट के साथ एक बैठक में फुसलाया था। मोर्टिमर आंगन में आता है, वह लीसेस्टर को सूचित करता है कि मैरी की खोज के दौरान काउंट को उसके पत्र की मसौदा प्रतियां मिली थीं। चालाक स्वामी मोर्टिमर को गिरफ्तार करने का आदेश देता है, यह महसूस करते हुए कि अगर वह रिपोर्ट करता है कि उसने एलिजाबेथ के खिलाफ साजिश का खुलासा किया है, तो उसे मारिया के पत्र का जवाब देते समय ध्यान में रखा जाएगा। लेकिन जवान को अधिकारियों के हाथों में नहीं दिया जाता है और अंत में खुद को छुरा घोंप दिया जाता है।

एलिजाबेथ बर्ली के साथ एक दर्शक ने लीस्टर के अर्ल को मैरी स्टुअर्ट को एक पत्र दिखाया। अपमानित रानी वंचित महिला के लिए मौत की सजा की पुष्टि करने के लिए तैयार है, लेकिन लिस्टर बल द्वारा उसके कक्षों में फट गया। वह रिपोर्ट करता है कि हत्या के प्रयास के बाद कब्जा कर लिया गया भिक्षु साजिश की श्रृंखला में एक कड़ी है, जिसका उद्देश्य लेडी स्टीवर्ट को मुक्त करना और उसे सिंहासन तक पहुंचाना था। दरअसल, उन्होंने कैदी के साथ पत्राचार किया, लेकिन यह केवल एक खेल था जो समय के साथ हो रहा था और अपने सम्राट की रक्षा करने के लिए था। उन्होंने साजिश के सर्जक - सर मोर्टिमर को जब्त कर लिया था, लेकिन वह खुद को छुड़ाने में कामयाब रहा। विशाल एलिजाबेथ अपने प्रेमी पर विश्वास करने के लिए तैयार है अगर वह खुद मैरी की मौत की सजा को अंजाम देगा।

शाही महल की खिड़कियों के नीचे के लोगों को लेडी स्टुअर्ट के लिए मौत की सजा की आवश्यकता है। प्रतिबिंब के बाद, एलिजाबेथ फिर भी निष्पादन पर अदालत के फैसले पर हस्ताक्षर करती है और इसे अपने सचिव को सौंपती है। कागज ने कहा कि स्कॉटिश रानी को पहले ही भोर में मार दिया जाना चाहिए। सचिव ने हिचकिचाते हुए कहा कि सजा के तत्काल प्रवर्तन के लिए इस दस्तावेज को देना है या नहीं, लेकिन रानी के स्वागत कक्ष में मौजूद लॉर्ड बर्ली ने कागज को अपने हाथों से फाड़ दिया।

फॉट्रिंगे कैसल के आंगन में एक मचान बनाया जा रहा है, और महल में ही मारिया ने अपने करीबी लोगों को अलविदा कह दिया। लेडी स्टुअर्ट शांत है, केवल अपने बटलर मेलविले के साथ निजी तौर पर वह स्वीकार करती है कि उसकी अंतरतम इच्छा कैथोलिक विश्वासपात्र के साथ संवाद करने की होगी। बूढ़ा व्यक्ति उसे प्रकट करता है कि उसने गरिमा ले ली है और अब वह अपने सभी पापों को माफ करने के लिए तैयार है। मरियम का आखिरी अनुरोध यह है कि उसकी मृत्यु के बाद उसकी इच्छा के अनुसार सब कुछ ठीक-ठीक पूरा हुआ। वह अपने दिल को फ्रांस भेजने और वहाँ दफन करने के लिए कहती है। काउंट लीसेस्टर प्रतीत होता है, वह एलिजाबेथ के आदेश को पूरा करने के लिए आया था - मैरी को फांसी की जगह तक पहुंचाने के लिए।

इस समय, शाही महल में, एलिजाबेथ Fotringey से समाचार की प्रतीक्षा कर रही है। श्रव्सबरी का एक पुराना अर्ल उसके पास आया, जिसने कहा कि मैरी के शास्त्री, जिन्होंने अदालत में अंग्रेजी सिंहासन की हत्या के प्रयास में अपनी मालकिन के अपराध को दर्शाया था, ने उनकी बातों से इनकार कर दिया और लेडी स्टुअर्ट को बदनाम करने की बात कबूल की। एलिजाबेथ ने एक अदालत के फैसले से अपने हस्ताक्षर में पश्चाताप को दर्शाया और सभी सुस्त सचिव को दोषी ठहराया। लार्ड बर्ले प्रवेश करता है। मैरी स्टुअर्ट ने अंजाम दिया। एलिजाबेथ ने उस पर जल्दबाज़ी में सज़ा देने का आरोप लगाया। लॉर्ड श्रुस्बरी ने आंगन छोड़ने के अपने फैसले की घोषणा की। फ्रांस में मैरी के वध के तुरंत बाद लीसेस्टर की पत्तियां गिना।